Bewährte Praktiken zum Testen der Wirksamkeit von Desinfektionsmitteln

Zusammenfassung

Desinfektionsmittel und Sporizide sind zur Kontrolle mikrobieller Kontaminationen in der pharmazeutischen, biotechnologischen und Medizingeräteindustrie unabdingbar. Von GMP-Produktionsstätten wird erwartet, dass sie anhand standortspezifischer Präparationsmethoden, die in den Standardverfahrensweisen beschrieben sind, demonstrieren können, dass die in kontrollierten Umgebungen verwendeten Biozide gegen Umgebungsisolate auf repräsentativen Oberflächen in ihren Werken wirksam sind. In diesem Artikel werden häufige Probleme vorgestellt, die von behördlichen Inspektoren beanstandet werden und bei der Qualifizierung der Desinfektionsmittel und Sporizide auftreten, und mögliche Schwierigkeiten bei der Durchführung von in-vitro-Wirksamkeitstests aufgezeigt.

Qualifizierung des Desinfektionsmittels1

1. In-vitro -Test

Labortest, der die Wirksamkeit der ausgewählten Chemikalien gegen Umgebungsisolate auf repräsentativen Oberflächen zeigt, die für die Anlage spezifisch sind.

2. In-situ-Test

Ein statistischer Vergleich der Isolationshäufigkeit und der Anzahl der Mikroorganismen, die vor und nach dem Einsatz eines neuen Desinfektionsmittels isoliert werden (Daten werden durch Überwachung der Umgebung ermittelt).

Warum sollten Desinfektionsmittel qualifiziert werden?

- Wird von den Behörden als Teil eines verlässlichen Reinigungs- und Desinfektionsprogramms erwartet – Die Eignung, Wirksamkeit und Grenzen der Desinfektionsmittel und -verfahren sollten bewertet werden ("The suitability, efficacy, and limitations of disinfecting agents and procedures should be assessed").2

- EPA-Registrierungsanforderungen für Biozid- Produkte legen nicht fest, wie diese in der pharmazeutischen, biotechnologischen und Medizingeräteindustrie verwendet werden.

FDA 483/Kategorien für Warning letters

-Keine Daten vorhanden, die die Eignung der verwendeten Biozide belegen

- Umgebungsisolate nicht im Test enthalten

- Testcoupons sind nicht repräsentativ für Fußböden, Wände und Arbeitsflächen im aseptischen Behandlungsbereich einschließlich abgenutzter oder beschädigter Flächen

- Keine Daten vorhanden, die das Verfallsdatum von Gebrauchslösungen belegen (z. B. Haltezeit)

- Keine Daten zur Definition der Kontaktzeit (die Kontaktzeit mit sichtbar nassen Flächen sollte in der in den Standardverfahrensweisen der Anlage angegebenen Zeitspanne erreichbar sein)

Requalifizierung

- Jährlich überprüfen, um das Risiko und die eingetretenen Änderungen zu bewerten

- Eine Neuqualifizierung kann in den folgenden Fällen erforderlich sein:
• Es wurden neue Desinfektionsmittel eingeführt
• Die Keimzahl der Umgebung hat sich verändert und/oder es wurden inhärent resistente Organismen isoliert (z. B. B. cereus)
• Es wurden neue Oberflächen eingerichtet
• Es gab Änderungen bei kritischen Parametern für die Desinfektionsmittelverwendung

In-vitro-Test

Die häufigsten Ursachen für nicht bestandene Tests:

Allgemeines:

- Testen von Bioziden gegen unzutreffende Mikroben
- Verwenden von ungeeigneten Methoden
- Unzureichende Planung
- Ungenügende Kontaktzeit

Neutralisierung:

- Ungeeignete Neutralisierung
- Toxizität des Neutralisators

Inokulum:

- Geringe Lebensfähigkeit von Inokulumsuspensionen
- Fehlerhaft präparierte Pilzsporensuspensionen und bakterielle Sporensuspensionen

Oberflächen:

- Poröse Oberflächen
- Testcoupons nicht zugänglich für Dampfsterilisation
- Uneinheitliche Inokulation oder Produktabdeckung aufgrund von Wölbungen oder Oberflächenspannung

Wiederfindung:

- Abtötende Wirkung nach dem Trocknen (z. B. P. aeruginosa)
- Festlegen künstlich hoher Log-Reduktionsziele
- Endgültige Platten sind nicht zählbar
- Wiederfindungsmethode nicht validiert

Wichtige Überlegungen zur Vermeidung nicht bestandener Tests

Allgemeines

- Produktetiketten lesen, um Ansprüche und Einschränkungen der einzelnen Produkte zu verstehen (z. B. Wirksamkeitsansprüche und Kontaktzeiten).

- Korrekten Chemikalientyp für Ziel-Organismen verwenden (z. B. keinen 70% IPA oder Quats gegen bakterielle Endosporen einsetzen).

- AOAC-Methoden sind für diese Tests nicht geeignet (einige Verfahren wie die Präparierung von Inokulum und Sporensuspensionen können jedoch nützlich sein).

- Die Methoden ASTM E2197 und EN-13697 ermöglichen wertvolle Einblicke in quantitative Oberflächentests.

- Physische Entfernung und chemische Abtötung nicht in einer Studie kombinieren.

- In den internen Standardverfahrensweisen festgelegte Verfallsdaten in die Studie aufnehmen.

- Konsistenz ist unabdingbar für das Ergebnis.

- Die Vorab-Planung ist extrem wichtig und es sind möglicherweise einige experimentelle Tests erforderlich.

Neutralisierung

- Neutralisierungsmethode muss validiert werden.

- Wirksamkeit und Toxizität des Neutralisators müssen getestet werden.

- Vor dem Starten der Studie sind möglicherweise einige Versuche und Experimente erforderlich.

- Es steht kein universeller Neutralisator für alle Desinfektionsmittel zur Verfügung.

Inokulum

- Bakterielle Suspensionen aus 18-24-Stunden-Kulturen präparieren und die Flächen sofort damit impfen; nicht über mehrere Tage verwenden.

- Pilzsporensuspension zum Testen und Verifizieren des Sporengehalts verwenden Hyphen/Myzelien können verhindern, dass das Biozid die Sporen kontaktiert und durchdringt.

- Bakterielle Sporensuspensionen entsprechend einer empfohlenen Methode wie AOAC präparieren; ≥90% Sporen.

Oberflächen

- Kleinere Testcoupons (1–2 cm) können einfacher verarbeitet und neutralisiert werden.

- Rückstände mit 70 %igem IPA entfernen.

- Alternative Sterilisationsmethoden verwenden (z. B. VHP®, Trockenhitze), wenn die Flächen nicht autoklaviert werden können.

Wiederfindung

- Wiederfindungsmethode muss validiert werden.

- Eine Beschallung kann die Wiederfindung unterstützen.

- Beimpfte Testcoupons so kurz wie möglich trocknen und sofort testen.

- Wiederfindungsmethode vor dem Starten der formalen Tests in experimentellen Studien bewerten.

Schlussbemerkung

Die Qualifizierung von Desinfektionsmitteln ist ein kritischer Schritt bei der Validierung des Desinfektionsprozesses, der an einer sterilen Produktionsstätte verwendet wird. Unabhängig davon, ob der in-vitro-Test intern oder in einem Vertragslabor durchgeführt wird, ist zur Vermeidung der zahlreichen Probleme und Schwierigkeiten, die diese Studien mit sich bringen, immer eine sorgfältige Planung, gewissenhafte Beachtung von Details und viel Umsicht erforderlich, um ein positives Ergebnis zu erzielen.

Literaturangaben

1.USP 37 Ch Disinfectants and Antiseptics.
2.FDA Guidance for Industry, Sterile Drug Products Produced by Aseptic Manufacturing – Current Good Manufacturing Practice. Sep. 2004. S. 34.